Bio-Seeq 手持式PCR生物戰(zhàn)劑檢測儀:
Bio-Seeq,臺應(yīng)用PCR 技術(shù)的便攜、手持式、thermocycler,能夠快速、精確檢測細菌和病毒的病原體的檢測儀?梢远ㄐ、定量分析樣品,并可保存活體。
Bio-Seeq 手持式PCR生物戰(zhàn)劑檢測儀,并能夠在小于30 分鐘的時間內(nèi)檢測1CFU。小型,緊湊及牢固的設(shè)計使它成為的手持式生物戰(zhàn)劑檢測儀,并廣泛地應(yīng)用在國家安全和軍事中;具有超大的按鍵的隔膜鍵盤,了使用人員在佩帶厚重的防護手套時仍能方便的操作使用。
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ABI Ambion Am1005 一步法熒光定量RT-PCR試劑盒
ABI Am1005 AgPath-ID? One-Step RT-PCR Kit一步法熒光定量RT-PCR試劑盒
規(guī)格 100次
貨號 AM1005
品牌 ABI Ambion Life Technologies
產(chǎn)品詳細描述
ABI AM 1005 AgPath-ID? One-Step RT-PCR Kit試劑盒——簡便高效的RNA病源RT-PCR檢測試劑盒
特點:
1)高靈敏,高特異的穩(wěn)定的RNA病源RT-PCR檢測試劑盒
2)簡便快速,1小時內(nèi)可以獲得檢測結(jié)果
3)組分很少,反應(yīng)組裝方便
AgPath-ID? 一步法RT-PCR試劑盒利用一種快速單管實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR方法,可靈敏穩(wěn)定地擴增RNA靶點。
? 推薦用于RNA病原體擴增
? 一致的RNA靶位擴增,高特異性,高靈敏度
? 已經(jīng)過優(yōu)化,與靶位特異性引物和探針一同使用
? 含有ROX,可用于定量熒光信號的標準化
AgPath-ID? AgPath-ID? 一步法 RT-PCR試劑配置用于快速簡單地設(shè)置反應(yīng)。所有反應(yīng)集于一管,最大程度降低樣本處理錯誤,縮短設(shè)置時間。組裝好之后,約1小時內(nèi)即可獲得結(jié)果。試劑盒中的RT-PCR酶混合液組分有高效的 ArrayScript? 逆轉(zhuǎn)錄酶、可提供高產(chǎn)量cDNA的突變MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶和用于特異性靶點擴增的熱啟動DNA聚合酶—AmpliTaq Gold? 聚合酶。2X RT-PCR緩沖液包含有優(yōu)化的試劑,用于高效穩(wěn)定地進行的逆轉(zhuǎn)錄和PCR;緩沖液中還含有專利參比熒光ROX,用于定量熒光信號的標準化。該試劑盒還提供了可選的檢測增強劑,可擴增具有富GC區(qū)或頑固二級結(jié)構(gòu)的模板。
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北京冬璞泰和科技有限責(zé)任公司
聯(lián)系人:馬林
電話: 13716040241
QQ:1815596477
中文名稱:DPCR1蛋白抗體
英文名稱:DPCR1
產(chǎn)品編號:RY-K9057
抗體規(guī)格:0.1ml/0.2ml
研究領(lǐng)域:腫瘤、細胞生物、染色質(zhì)和核信號、神經(jīng)生物學(xué)、細胞凋亡、細胞周期蛋白、線粒體
抗體來源:Rabbit
交叉反應(yīng):人, 小鼠, 大鼠, 雞, 犬, 豬, 牛, 兔 羊,
產(chǎn)品應(yīng):WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復(fù))
尚未在其他應(yīng)用程序中測試。
最佳稀釋度/濃度應(yīng)該由最終用戶確定。
分 子 量:57kDa
細胞定位:細胞核 細胞漿 線粒體
性 狀:凍干或液體
濃 度:1mg/1ml
免 疫 原: KLH結(jié)合來自人AIF蛋白合成肽
亞 型:IgG
純化方法:affinity purified by Protein A
儲 存 液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件存儲:在- 20°C為一年。避免重復(fù)凍融循環(huán)。凍干抗體穩(wěn)定在至少一個月室溫超過一年保持在20°當用無菌PBS pH 7.4緩沖或稀釋的抗體抗體穩(wěn)定至少兩周在2-4°C.
生 產(chǎn) 商:上海潤裕生物科技有限公司
抗體溶解方法:
方法一:我們的抗體(凍干粉)已經(jīng)包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐劑(疊氮鈉或慶大霉素),您只需要加入滅菌的雙蒸水就行了。抗體溶解后,置于-20℃保存,最好分裝后使用,避免反復(fù)凍融,可保證至少1年有效;
方法二:也可以只加入一半體積的雙蒸水,再用一半體積的甘油補足,置于-20℃保存,這樣抗體不會凍,有利于抗體的穩(wěn)定。
后續(xù)試驗時,再使用對應(yīng)的緩沖液稀釋成工作液,即用即配。
我們的抗體(凍干粉),在常溫放置下,至少一個月有效;若在-20℃下保存(推薦),至少三年有效。
抗體修復(fù)方式:
修復(fù)液:0.01M 枸櫞酸(pH6.0)或者0.05M EDTA(pH8.0)
抗體修復(fù)方法:
方法1:沸水浴修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境,保持外部沸騰狀態(tài)15min,自然冷卻至室溫;
方法2:微波修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中,高火5min,停火3min,中火5min,自然冷卻至室溫。
DPCR1蛋白抗體等相關(guān)抗體如下:
RY-K4176英文名稱:SLC29A4中文名稱:腦質(zhì)膜單胺轉(zhuǎn)運蛋白PMAT抗體
RY-K4775英文名稱:KCNMA1/BK channel中文名稱:鈣激活鉀通道蛋白α1抗體
RY-K13446英文名稱:Phospho-Glycogen synthase 1(Ser645)中文名稱:磷酸化葡萄糖合成酶1抗體
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RY-K3997英文名稱:SLC25A10中文名稱:線粒體二羧酸載體蛋白抗體
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RY-K9406英文名稱:CT135/ODF3中文名稱:腫瘤/睪丸抗原135抗體
RY-K3904英文名稱:HSD11B1中文名稱:羥基類固醇脫氫酶11β1抗體
人活化蛋白C抵抗素(APCR)elisa試劑盒 美旋生物專業(yè)供應(yīng)各種ELISA試劑盒產(chǎn)品,歡迎郵件、QQ、電話詢價或索取原版說明書
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試劑的準備 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。 洗板方法小鼠可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體 ELISA Kit市場價格,sEPCR ELISA Kit檢測原理 現(xiàn)貨1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。2. 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
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產(chǎn)品名稱:小鼠可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒
聯(lián)系電話135 6451 5386 QQ 1161399267 余先生
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
檢測方法: ELISA酶聯(lián)免疫法
說 明 書:隨貨發(fā)送,也可直接聯(lián)系在線銷售索取
測試種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
試劑盒保存及有效期:2-8℃,避光保存:6個月。
產(chǎn)品產(chǎn)地:進口/國產(chǎn)
產(chǎn)品庫存:
品牌:自主研發(fā)/進口原裝
產(chǎn)品價格:價格優(yōu)惠,歡迎來電洽談!
試劑盒使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.
產(chǎn)品價格:價格優(yōu)惠,歡迎來電洽談!
ELISA試劑盒定性定量檢測一步到位,可同時大批量完成多種屬的檢測工作,而且一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本,正規(guī)專業(yè)的我們,一定能幫您,將實驗做得更好,更精確。試驗過程中,如有任何疑問都可和我們聯(lián)系,無論是售前、售中、售后我們都將始終如一,將優(yōu)質(zhì)服務(wù)進行到底本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中酸性磷酸酶(ACP)含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠酸性磷酸酶(ACP)水平。用純化的小鼠酸性磷酸酶(ACP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入酸性磷酸酶(ACP),再與HRP標記的酸性磷酸酶(ACP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的酸性磷酸酶(ACP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠酸性磷酸酶(ACP)濃度。小鼠酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒組成:試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存說明書 1份 1份 封板膜 2片(48) 2片(96) 密封袋 1個 1個 酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存標準品:720ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存標準品稀釋液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存酶標試劑 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存小鼠酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒樣本處理及要求:1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。小鼠酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒操作步驟標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為 詳見說明書(業(yè)務(wù)人員可提供))。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。小鼠酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒注意事項:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,最好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算: 以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標, 在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD 值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋 倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標 準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值 代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋 倍數(shù),即為樣品的實際濃度。 。ù藞D僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為 (詳見說明書)以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于(詳見說明書) 檢測范圍: 詳見說明書(業(yè)務(wù)人員可提供) 保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月
關(guān)于ELISA試劑盒
ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。
ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到全世界科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。
Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。
免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標記物如酶標結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。
HBsAg試劑特點(檢測模式:臨床抗體夾心法):包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反應(yīng)性。酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點的鼠復(fù)合單位,可測得HBsAg變異樣品,提高檢測的特異性(99.98%)提高檢測的靈敏度,應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說(PEI)HBsAg標準品,對ad標準品的靈敏度為0.05ng/ml對ay標準品靈敏度為0.025ng/ml
ELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會與第一次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標準, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。
LISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
然而,影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點。
特點:一、高效、靈敏、特異的抗體; 二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性; 三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體; 四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型; 五、節(jié)省實驗經(jīng)費。
elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出標準數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關(guān)系,說明方法的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標準樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為2.98mg/L,則認為回收率為99%。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4. 試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
5. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9. 洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
10. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
11. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
12. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
elisa試劑盒測試要求
做好對照
正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
實驗條件的選擇
在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
檢測范圍和靈敏度不同,用量少時,可使用分裝,前期是它的長久性不是很好。
試劑盒的標準曲線最高點OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
試劑盒的標準曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.98。
試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %。
試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。
檢測抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準確地做稀釋工作,保證實驗結(jié)果的重復(fù)性
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴大
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Sheep leptin ELISA kit綿羊瘦素(leptin)ELISA試劑盒96T/48T
Mouse Immunoglobulin G,IgG Elisa Kit小鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒96T/48T
Human Surface Membrane Immunoglobulin,SmIg ELISA Kit人細胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA試劑盒 96T/48T
Human tissue inhibitor of metal protease 1,TIMP-1 ELISA Kit人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒96T/48T